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測(cè)定意義
ACE1是人體內(nèi)一個(gè)非常重要的生理調(diào)節(jié)酶，它能夠?qū)o(wú)活性的血管緊張素I，切掉兩個(gè)氨基酸，轉(zhuǎn)化為有強(qiáng)效收縮血管作用的血管緊張素II。能同時(shí)降解具有擴(kuò)血管作用的緩激肽，使其失去活性。由于這兩個(gè)作用都會(huì)導(dǎo)致血壓升高，因此ACE1是調(diào)控血壓的關(guān)鍵靶點(diǎn)。
本試劑盒適用于血清(漿)，動(dòng)物組織樣本中的血管轉(zhuǎn)化素酶活力。
測(cè)定原理
N-[3-(2-呋喃基)丙烯酰]-L-苯丙氨酰-甘氨酰-甘氨酸（FAPGG）在340nm處有最大吸收峰，ACE1催化底物FAPGG水解生成呋喃酰基苯丙氨酸(FAP) 及雙甘氨肽(GG)，從而引起340nm處吸光度的下降，通過(guò)測(cè)定FAPGG在340 nm處吸光度下降的速度可計(jì)算出ACE1的活性。
自備儀器和用品
酶標(biāo)儀、恒溫箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、生理鹽水、冰、和蒸餾水。
試劑清單
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試劑名稱(chēng) |
規(guī)格 |
數(shù)目 |
貯藏 |
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試劑一 |
液體0.8mL |
x1 |
4℃，避光 |
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試劑二 |
液體20mL |
x1 |
4℃ |
預(yù)實(shí)驗(yàn)的意義
比色法檢測(cè)試劑盒預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測(cè)，以免造成試劑盒和樣本的浪費(fèi)（比如低表達(dá)處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測(cè)定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或問(wèn)題，以便于及時(shí)作出調(diào)整；
5、通過(guò)3 - 5組預(yù)實(shí)驗(yàn)，判斷試劑盒對(duì)于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)樣本稀釋比例。
注意
正式測(cè)定前務(wù)必取 3 - 5 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
